Soluție inovatoare de diagnostic pentru TB și DR-TB prin #Macro & Micro-Test!

O nouă armă pentru diagnosticarea tuberculozei și detectarea rezistenței la medicamente: o secvențiere țintită de nouă generație (tNGS) combinată cu învățarea automată pentru diagnosticarea hipersensibilității la tuberculoză

Raport de literatură: CCa: un model de diagnostic bazat pe tNGS și învățare automată, potrivit pentru persoanele cu tuberculoză bacteriană mai puțin frecventă și meningită tuberculoasă.

Titlul tezei: Secvențiere de generație următoare țintită asupra tuberculozei și învățare automată: o strategie de diagnostic ultra-sensibilă pentru tubularii pulmonari paucifici și meningita tubulară.

Periodic: 《Clinica Chimica Acta》

DACĂ: 6,5

Data publicării: ianuarie 2024

În colaborare cu Universitatea Academiei Chineze de Științe și Spitalul Toracic din Beijing al Universității Medicale Capital, Macro & Micro-Test a stabilit un model de diagnostic al tuberculozei bazat pe tehnologia de secvențiere țintită de nouă generație (tNGS) și metoda de învățare automată, care a oferit o sensibilitate de detectare ultra-ridicată pentru tuberculoza cu puține bacterii și meningita tuberculoasă, a furnizat o nouă metodă de diagnosticare a hipersensibilității pentru diagnosticul clinic a două tipuri de tuberculoză și a ajutat la diagnosticul precis, detectarea rezistenței la medicamente și tratamentul tuberculozei. În același timp, s-a constatat că ADN-ul plasmatic cfD al pacientului poate fi utilizat ca un tip de probă adecvat pentru prelevarea de probe clinice în diagnosticarea TBM.

În acest studiu, 227 de probe de plasmă și lichid cefalorahidian au fost utilizate pentru a stabili două cohorte clinice, în care probele de cohortă de diagnostic de laborator au fost utilizate pentru a stabili modelul de învățare automată pentru diagnosticul tuberculozei, iar probele de cohortă de diagnostic clinic au fost utilizate pentru a verifica modelul de diagnostic stabilit. Toate probele au fost mai întâi direcționate de un grup de sonde de captură special concepute pentru Mycobacterium tuberculosis. Apoi, pe baza datelor de secvențiere TB-tNGS, modelul arborelui decizional este utilizat pentru a efectua o validare încrucișată de 5 ori pe seturile de antrenament și validare ale cozii de diagnostic de laborator, și se obțin pragurile de diagnostic ale probelor de plasmă și ale probelor de lichid cefalorahidian. Pragul obținut este introdus în două seturi de teste ale cozii de diagnostic clinic pentru detectare, iar performanța diagnostică a elevului este evaluată prin curba ROC. În final, a fost obținut modelul de diagnostic al tuberculozei.

Fig. 1 diagrama schematică a designului cercetării

Rezultate: Conform pragurilor specifice ale probei de ADN din LCR (ASC = 0,974) și ale probei de ADN cf din plasmă (ASC = 0,908) determinate în acest studiu, dintre cele 227 de probe, sensibilitatea probei de LCR a fost de 97,01%, specificitatea a fost de 95,65%, iar sensibilitatea și specificitatea probei de plasmă au fost de 82,61% și, respectiv, 86,36%. În analiza a 44 de probe pereche de ADN cf din plasmă și ADN din lichidul cefalorahidian de la pacienți cu tuberculoză pulmonară (TBM), strategia de diagnostic a acestui studiu are o consistență ridicată de 90,91% (40/44) în ceea ce privește ADN cf din plasmă și ADN din lichidul cefalorahidian, iar sensibilitatea este de 95,45% (42/44). La copiii cu tuberculoză pulmonară, strategia de diagnostic a acestui studiu este mai sensibilă la probele de plasmă decât rezultatele detectării Xpert a probelor de suc gastric de la aceiași pacienți (28,57% VS 15,38%).

Fig. 2 Performanța analizei modelului de diagnostic al tuberculozei pentru eșantioane populaționale

Fig. 3 Rezultate diagnostice ale probelor pereche

Concluzie: În acest studiu a fost stabilită o metodă de diagnostic hipersensibilă pentru tuberculoză, care poate oferi un instrument de diagnostic cu cea mai mare sensibilitate de detectare pentru pacienții clinici cu tuberculoză oligobacilară (cultură negativă). Depistarea tuberculozei hipersensibile pe baza ADN-ului plasmatic cfADN poate fi un tip de probă potrivit pentru diagnosticarea tuberculozei active și a meningitei tuberculoase (probele de plasmă sunt mai ușor de colectat decât lichidul cefalorahidian pentru pacienții suspectați de tuberculoză cerebrală).

Link original: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0009898123004990? via%3Dihub

Scurtă prezentare a produselor de detectare a tuberculozei din seria Macro & Micro-Test

Având în vedere situația complicată a probelor pacienților cu tuberculoză și nevoile variate, Macro & Micro-Test oferă un set complet de soluții NGS pentru extracția prin lichefiere din probele de spută, construirea și secvențierea bibliotecilor Qualcomm și analiza datelor. Produsele acoperă diagnosticarea rapidă a pacienților cu tuberculoză, detectarea rezistenței la medicamente a tuberculozei, tipizarea Mycobacterium tuberculosis și NTM, diagnosticarea hipersensibilității la tuberculoza bacteriene-negativă și la persoanele cu tuberculoză etc.

Kituri de detectare serială pentru tuberculoză și micobacterii:

Nr. articol numele produsului conținut de testare a produselor tip de eșantion model aplicabil
HWTS-3012 Agent de eliberare a probei Utilizat în tratamentul de lichefiere a probelor de spută, a obținut un număr de înregistrare de primă clasă, Sutong Machinery Equipment 20230047. spută
HWTS-NGS-P00021 Kit Qualcomm de detectare a cantității pentru tuberculoza hipersensibilă (metoda de captare a sondei) Detectarea hipersensibilității neinvazivă (biopsie lichidă) pentru tuberculoza pulmonară și nodulii cerebrali bacterio-negativi; Probele de la persoanele suspectate a fi infectate cu micobacterii tuberculoase sau non-tuberculoase au fost analizate prin metagenomică de secvențiere de înaltă aprofundare, fiind furnizate informații de detectare a infecției cu micobacterii tuberculoase sau non-tuberculoase, precum și principalele informații privind rezistența la medicamentele de primă linie pentru Mycobacterium tuberculosis. Sânge periferic, lichid de lavaj alveolar, hidrotorax și ascită, probă de puncție focală, lichid cefalorahidian. A doua generație
HWTS-NGS-T001 Kit de tipizare a micobacteriilor și detectare a rezistenței la medicamente (metodă de secvențiere a amplificării multiplex) Test de tipizare a micobacteriilor, inclusiv MTBC și 187 NTMDetectarea rezistenței la medicamente a Mycobacterium tuberculosis acoperă 13 medicamente și 16 situsuri de mutație principale ale genelor de rezistență la medicamente. Spută, lichid de lavaj alveolar, hidrotorax și ascită, probă de puncție focală, lichid cefalorahidian. Platformă duală de a doua/a treia generație

Repere: HWTS-NGS-T001 Kit de tipizare a micobacteriilor și detectare a rezistenței la medicamente (metodă de amplificare multiplex)

Introducerea produsului

Produsul se bazează pe principalele medicamente de primă și a doua linie descrise în ghidurile OMS de tratament al tuberculozei, macrolide și aminoglicozide utilizate în mod obișnuit în ghidurile de tratament NTM, iar situsurile de rezistență la medicamente acoperă întregul grup de situsuri legate de rezistența la medicamente din catalogul OMS de mutații ale complexului Mycobacterium tuberculosis, precum și alte gene de rezistență la medicamente și situsuri de mutații raportate, conform investigațiilor și statisticilor literaturii de specialitate cu scoruri ridicate din țară și din străinătate.

Identificarea tipizării se bazează pe tulpinile NTM rezumate în ghidurile NTM publicate de Jurnalul Chinez de Tuberculoză și Boli Respiratorii și pe consensul experților. Primerii de tipizare concepuți pot amplifica, secvenția și adnota peste 190 de specii NTM.

Prin tehnologia de amplificare PCR multiplex țintită, genele de genotipare și genele rezistente la medicamente ale Mycobacterium au fost amplificate prin PCR multiplex, obținându-se combinația de ampliconi ai genelor țintă care urmează a fi detectate. Produsele amplificate pot fi construite în biblioteci de secvențiere de mare randament de a doua sau a treia generație, iar toate platformele de secvențiere de a doua și a treia generație pot fi supuse unei secvențieri de mare profunzime pentru a obține informații despre secvența genelor țintă. Prin compararea cu mutațiile cunoscute conținute în baza de date de referință încorporată (inclusiv catalogul de mutații al complexului Mycobacterium tuberculosis al OMS și relația sa cu rezistența la medicamente), au fost determinate mutațiile legate de rezistența la medicamente sau susceptibilitatea la medicamentele antituberculoase. În combinație cu soluția de tratare a probelor de spută auto-deschisă Macro & Micro-Test, a fost rezolvată problema eficienței scăzute de amplificare a acidului nucleic al probelor clinice de spută (de zece ori mai mare decât cea a metodelor tradiționale), astfel încât detectarea secvențierii rezistenței la medicamente poate fi aplicată direct probelor clinice de spută.

Interval de detectare a produsului

34gene legate de rezistența la medicamente ale18medicamente antituberculoase și6Au fost detectate droguri NTM, acoperind297situsuri de rezistență la medicamente; Zece tipuri de Mycobacterium tuberculosis și mai mult de190au fost detectate tipuri de NTM.

Tabelul 1: Informații despre 18+6 medicamente +190+NTM

Avantajul produsului

Adaptabilitate clinică puternică: probele de spută pot fi detectate direct cu agent de autolichefiere, fără cultură.

Operațiunea experimentală este simplă: prima rundă de operațiune de amplificare este simplă, iar construcția bibliotecii este finalizată în 3 ore, ceea ce îmbunătățește eficiența muncii.

Tipizare și rezistență la medicamente cuprinzătoare: acoperirea situsurilor de tipizare și rezistență la medicamente ale MTB și NTM, care sunt punctele cheie de interes clinic, tipizare precisă și detectarea rezistenței la medicamente, suport pentru software de analiză independent și generarea de rapoarte de analiză cu un singur clic.

Compatibilitate: compatibilitate a produsului, adaptare la platformele ILM și MGI/ONT obișnuite.

Specificații ale produsului

Cod produs numele produsului Platformă de detectare specificații
HWTS-NGS-T001 Kit de tipizare a micobacteriilor și detectare a rezistenței la medicamente (metodă de amplificare multiplex) ONT、Illumina、MGI、Salus pro 16/96rxn

Data publicării: 23 ian. 2024