Gena de rezistență la carbapeneme (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Numele produsului
Kit de detectare a genei de rezistență la carbapeneme HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR cu fluorescență)
Epidemiologie
Antibioticele carbapenemice sunt antibiotice β-lactamice atipice cu cel mai larg spectru antibacterian și cea mai puternică activitate antibacteriană. Datorită stabilității lor față de β-lactamază și toxicității reduse, au devenit unul dintre cele mai importante medicamente antibacteriene pentru tratamentul infecțiilor bacteriene severe. Carbapenemele sunt foarte stabile față de β-lactamazele cu spectru extins (BLSE) mediate de plasmide, cromozomi și cefalosporinaze mediate de plasmide (enzime AmpC).
Canal
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Control intern | Control intern |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Parametri tehnici
| Depozitare | ≤-18℃ |
| Termen de valabilitate | 12 luni |
| Tipul de specimen | Spută, colonii pure, tampon rectal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| Nivel de detaliere (LoD) | 103UFC/ml |
| Specificitate | a) Kitul detectează referințele negative standardizate ale companiei, iar rezultatele îndeplinesc cerințele referințelor corespunzătoare. b) Rezultatele testului de reactivitate încrucișată arată că acest kit nu prezintă reacții încrucișate cu alți agenți patogeni respiratori, cum ar fi Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, adenovirus respirator, Enterococcus sau probe care conțin alte gene rezistente la medicamente CTX, mecA, SME, SHV, TEM etc. c) Anti-interferență: Mucină, Minociclină, Gentamicină, Clindamicină, Imipenem, Cefoperazonă, Meropenem, Clorhidrat de Ciprofloxacină, Levofloxacină, Acid Clavulanic, Roxitromicină sunt selectate pentru testul de interferență, iar rezultatele arată că substanțele interferente menționate mai sus nu au nicio reacție interferențială la detectarea genelor de rezistență la carbapeneme KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM și IMP. |
| Instrumente aplicabile | Sisteme PCR în timp real Applied Biosystems 7500 Sisteme PCR în timp real QuantStudio®5 Sisteme PCR în timp real SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistem PCR în timp real LightCycler®480 Sistem de detectare PCR în timp real LineGene 9600 Plus (FQD-96A，HangzhouTehnologie Bioer) Termociclator cantitativ în timp real MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistem PCR în timp real BioRad CFX96 Sistem PCR în timp real BioRad CFX Opus 96 |
Flux de lucru
Opțiunea 1.
Reactiv de extracție recomandat: Kitul Macro & Micro-Test General DNA/RNA (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (care poate fi utilizat cu extractorul automat de acid nucleic Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) de Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Adăugați 200 μL de soluție salină normală la precipitatul de tal. Pașii următori trebuie să respecte instrucțiunile pentru extracție, iar volumul de eluție recomandat este100 μL.
Opțiunea 2.
Reactiv de extracție recomandat: Reactiv de extracție sau purificare a acidului nucleic (YDP302) de la Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Extracția trebuie inițiată în strictă conformitate cu pasul 2 din instrucțiunile de utilizare (adăugați 200 μL de soluție tampon GA la precipitatul de tal și agitați până când talul este complet suspendat). Folosiți apă fără RNază/DNază pentru eluție, iar volumul de eluție recomandat este de 100 μL.
Opțiunea 3.
Reactiv de extracție recomandat: Reactiv de eliberare a probei Macro & Micro-Test. Proba de spută trebuie spălată prin adăugarea a 1 ml de soluție salină normală la precipitatul de talus tratat menționat mai sus, centrifugată la 13000 r/min timp de 5 minute, iar supernatantul se aruncă (se păstrează 10-20 µL de supernatant). Pentru colonii pure și tampon rectal, se adaugă 50 μL de reactiv de eliberare a probei direct la precipitatul de talus tratat menționat mai sus, iar pașii următori trebuie extrași conform instrucțiunilor de utilizare.
